一、酵母蛋白表達服務簡介
酵母表達系統(tǒng),是工業(yè)微生物中應用較廣泛的系統(tǒng),遺傳和生理背景清楚而且安全,結合了原核和高等真核表達系統(tǒng)的優(yōu)點:生長快、培養(yǎng)成本低廉、操作簡單并且蛋白翻譯后能進行正確加工、修飾和折香、表達的重組蛋白更加穩(wěn)定、適于表達真核生物基因和制備有功能的蛋白質。
二、武漢科斯坦生物優(yōu)勢
1.表達宿主包括釀酒酵母和畢赤酵母,蛋白表達成功率高o
2.可提供多種酵母表達載體:有適用于分泌表達及胞內表達的營養(yǎng)缺陷型表達載體;有可以直接轉化野生型畢赤酵母并且高效篩選表達菌株的載體等。
3.豐富的酵母表達經驗:可根據客戶需求選擇合適的載體,為客戶進行整個表達體系的條件摸索及優(yōu)化。
4.高通量的酵母轉化篩選平臺,豐富的酵母蛋白表達經驗:很多原核表達的分泌型蛋白會出現不溶或包涵體無活性情況,選擇酵母表達系統(tǒng)則可避免這些問題,成功表達蛋白。
5大規(guī)模生產:可滿足每批次1-4000L的生產規(guī)模。
6.一站式服務:基因設計及優(yōu)化、蛋白表達條件優(yōu)化、組成型表達菌株構建、蛋白純化及后續(xù)加工處理、數據及報告整理。
三、服務內容
服務名稱 | 服務內容 | 服務周期 | |
表達體系選擇 | 表達載體:pPIC9k、 pPIC3.5、 pPICZQA、 pA0815、 pGAP a、pYES2/NTA 表達菌株:GS115、KM71、X33、INVSC1 |
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表達載體構建 | 基因優(yōu)化及設計,合成基因及亞克隆 | 2-4周 | |
表達及純化測試 | 質粒線性化、轉化、抗性平板篩選、PCR鑒定或梯度加壓 篩選、表達分析鑒定SDS-PAGE and/or WB)、最優(yōu)條 件100mL擴大及純化測試、標簽去除測試(可選) | 3-6周 | |
1-10L表達及純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白buffer置換濃 縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化后蛋白、MS鑒定(可選)包 涵體變復性(可選)、標簽去除(可選) | 2-3周 | |
大規(guī)模發(fā)酵與純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白Buffer置換濃 縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化后蛋白、MS鑒定(可選) | 10-20L | 3-4周 |
20-50L | 4-5周 | ||
50L以上 | 6-12周 |
四、服務套餐
基礎套餐CS-1031:
針對一個質粒構建,測試20個陽性克隆,最佳克隆進行純化測試。
增強套餐CS-1032:
針對一個質粒構建,測試20個陽性克隆后,挑選最佳2株克隆進行表達條件優(yōu)化,最佳克隆及最佳表達條件進行純化測試。
加壓套餐CS-1033:
針對一個質粒構建,轉化后抗生素加壓篩選,挑選10株克隆進行表達條測試,挑選最佳2株克隆進行表達條件優(yōu)化,最佳克隆及最佳表達條件進行純化測試。
五、表達案例
六、咨詢與訂購
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