首頁一、昆蟲蛋白表達(dá)服務(wù)簡介
桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)，憑借其易于篩選、具有翻譯后修飾功能及高表達(dá)水平的優(yōu)勢，成為當(dāng)今應(yīng)用較廣泛的真核表達(dá)系統(tǒng)之一武漢科斯坦生物的桿狀病毒-昆蟲蛋白表達(dá)服務(wù)，采用經(jīng)典的Bac-to-Bac表達(dá)體系，并加以改進(jìn)。在表達(dá)方式(胞內(nèi)或分泌)，信號肽選擇，細(xì)胞培養(yǎng)方式及細(xì)胞選擇(Sf9Sf21Hi-5)方面有著豐富的案例經(jīng)驗(yàn)?？蔀閲鴥?nèi)外藥企，高校及科研客戶提供高達(dá)200L的蛋白表達(dá)純化服務(wù)。
二、武漢科斯坦生物優(yōu)勢
1高成功率:科斯坦生物桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)蛋白表達(dá)目前還沒有失敗案例。
2成熟的設(shè)計(jì)方案及條件篩選體系:根據(jù)蛋白性質(zhì)選擇胞內(nèi)表達(dá)或分泌表達(dá)，針對分泌表達(dá)可為客戶選擇高效分泌信號肽。表達(dá)細(xì)胞:Sf9、Sf21Hi-5，通過測試不同時間的MOI，摸索最佳表達(dá)條件以達(dá)到最優(yōu)表達(dá)量。
3大規(guī)模生產(chǎn):可同時進(jìn)行200L體系的表達(dá)及純化。
4一站式服務(wù):基因設(shè)計(jì)及優(yōu)化病毒生產(chǎn)、蛋白表達(dá)條件優(yōu)化、蛋白純化及后續(xù)加工處理、數(shù)據(jù)及報告整理。
二、服務(wù)內(nèi)容
| 服務(wù)名稱 | 服務(wù)內(nèi)容 | 服務(wù)周期 | |
| 表達(dá)體系選擇 | 表達(dá)載體:常規(guī)商業(yè)化載體系列、經(jīng)武漢科斯坦改造后的表達(dá)載體 表達(dá)細(xì)胞:Sf9 Sf21 Hi-5 |
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| 表達(dá)載體構(gòu)建 | 基因優(yōu)化及設(shè)計(jì)、基因合成及亞克隆 | 2-4周 | |
| 表達(dá)及純化測試 | 轉(zhuǎn)化及Bacmid鑒定、P1代病毒生產(chǎn)及表達(dá)測 試(SDS-PAGE and/or WB)、P2代病毒生 產(chǎn)及MOI測試(SDS-PAGE and/or WB)、最 優(yōu)條件200m1擴(kuò)大及純化測試、標(biāo)簽去除測試 (可選) | 3-5周 | |
| 1-10L表達(dá)及純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白 buffer置換濃縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化 后蛋白、MS鑒定(可選)、標(biāo)簽去除(可 選) | 1-3周 | |
| 大規(guī)模發(fā)酵與純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白 buffer置換濃縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化 后蛋白、MS鑒定(可選) | 10-20L | 2-4周 |
| 20-50L | 3-6周 | ||
| 50L 以上 | 4-12周 | ||
三、表達(dá)案例
昆蟲蛋白表達(dá)服務(wù)訂單，包含1L表達(dá)及純化。由于表達(dá)量達(dá)到了368mg/L(純化后)，純化測試即可獲得足量的蛋白。經(jīng)客戶驗(yàn)證，證明其活性良好，我們即刻交付約60mg蛋白，該訂單在純化測試階段結(jié)束。1L放大及純化費(fèi)用退還予客戶。
四、咨詢與訂購
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