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- 產品名稱： Reverse Transcriptase Ⅲ
- 產品貨號： CSRT0912
- 貨期： 現(xiàn)貨
- 價格與訂購： 1400
- 數(shù)量：
庫存： 100
- 規(guī)格： 10KU
- 產品信息
- 如何訂購
產品概述
Reverse TranscriptaseⅢ是通過體外大腸桿菌表達體系分子進化技術篩選獲得的全新逆轉錄酶，與原始逆轉錄酶相比，其 cDNA 合成速度快，且熱穩(wěn)定性大幅度提高，可耐受高達 60℃的反應溫度，適合具有復雜二級結構的 RNA 模板的逆轉錄。同時，該酶增強了與模板的親和力，非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉錄。Reverse TranscriptaseⅢ合成全長 cDNA 的能力也有了提升，可擴增長達 19.8 kb 的 cDNA。
產品組分
| 組 分 | CSRT0912 (10,000 U) |
| Reverse TranscriptaseⅢ (200 U/μl) | 50 μl |
| 5×BufferReverse TranscriptaseⅢ Buffer | 250 μl |
保存條件
-30 ~ -15℃保存，≤0℃運輸。
適用范圍
全長 cDNA 文庫構建；終點法 PCR；實時定量 PCR 等。
單位定義
以Poly(rA)·Oligo(dT)為模板/引物，在37℃，10 min條件下，摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質所需要的酶量定義為1個活性單位(U)。
注意事項
請保持實驗區(qū)域潔凈；操作時需穿戴干凈的手套、口罩；實驗所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。
第一鏈 cDNA 合成操作步驟
1. RNA 變性（此步為可選步驟，RNA 變性有助于打開二級結構，可在很大程度上提高第一鏈 cDNA 的產量。）
2. 逆轉錄反應體系配制（20 μL 體系）
3. 逆轉錄程序設置
【注】：1）當使用 Random Primers 時，需 25℃，孵育 5 min；若使用 Oligo (dT)18 或 Gene Specific Primers，此步可省略；
2）逆轉錄溫度：推薦使用 55℃；對于高 GC 含量模板或者復雜模板，可將逆轉錄溫度提高到 60℃；
3) 可將逆轉錄時間延長到 45-60min，有助于提高產量；
4）85℃加熱 5 min，目的是使逆轉錄酶失活。
※ 逆轉錄產物可立即用于后續(xù) PCR 或 qPCR 反應，也可-20℃短期保存，若需長期保存，建議分裝后，于-80℃保存，避免反復凍融。
Note
For research use only .
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