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  • 產(chǎn)品名稱： M-MLV(H-) Reverse Transcriptase
  • 產(chǎn)品貨號(hào)： CSRT0910
  • 貨期： 現(xiàn)貨
  • 價(jià)格與訂購： 400
  • 數(shù)量：
    庫存： 100
  • 規(guī)格： 10KU
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購
    產(chǎn)品概述
    M-MLV(H-) Reverse Transcriptase是通過體外大腸桿菌表達(dá)體系分子進(jìn)化技術(shù)篩選獲得的全新逆轉(zhuǎn)錄酶，與原始逆轉(zhuǎn)錄酶相比，MMLV(H-) Reverse Transcriptase大幅提高了熱穩(wěn)定性，在50℃的半衰期超過4h，可將逆轉(zhuǎn)錄溫度提高至50-55℃，避免RNA復(fù)雜二級(jí)
    結(jié)構(gòu)對cDNA合成的抑制，可有效合成高質(zhì)量的cDNA。同時(shí)，M-MLV(H-) Reverse Transcriptase增加了多個(gè)點(diǎn)突變，增強(qiáng)了模板親和
    力和行進(jìn)性，使得全長cDNA的合成能力有了大幅度提升，對于常見的逆轉(zhuǎn)錄抑制物具有更高的耐受度，非常適合于富含多糖多酚的植
    物組織RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
    產(chǎn)品組分
    組 分

                       CSRT0910 (10,000 U)                  
    M-MLV(H-) Reverse Transcriptase (200 U/μl) 50 μl
       
    保存條件
    -30 ~ -15℃保存，≤0℃運(yùn)輸。
    適用范圍
    本產(chǎn)品廣泛適用于動(dòng)物、植物以及微生物RNA的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
    適用場景
    RT-PCR擴(kuò)增；
    鏈cDNA合成；
    制備cDNA探針；
    合成具有高比例全長cDNAs的cDNA文庫。
    單位定義
    以Poly(rA)·Oligo(dT)為模板/引物，在37℃，10 min條件下，摻入1 nmol的dTTP為酸不溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位(U)。
    注意事項(xiàng)
    防止RNase污染
    請保持實(shí)驗(yàn)區(qū)域潔凈；操作時(shí)需穿戴干凈的手套、口罩；實(shí)驗(yàn)所用的離心管、槍頭等耗材均需保證RNase-free。
    引物選擇
    1.后續(xù)實(shí)驗(yàn)為PCR
    如果模板為真核生物來源，一般情況下首選Oligo dT，與真核生物mRNA的3' Poly A尾配對，可獲得最高產(chǎn)量的全長cDNA。
    基因特異性引物(GSP)的特異性最高。但有些情況下，用于PCR反應(yīng)的GSP無法有效引導(dǎo)第一鏈cDNA合成。這時(shí)，可改用Oligo dT或
    Random hexamers重新進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。
    Random hexamers特異性最低，所有RNA，包括mRNA，rRNA，tRNA均可以作為Random hexamers的模板。當(dāng)目標(biāo)區(qū)域具有復(fù)雜
    二級(jí)結(jié)構(gòu)或GC含量較高，或模板為原核生物來源，使用Oligo dT或基因特異性引物(GSP)無法有效引導(dǎo)cDNA合成時(shí)，可使用Random 
    hexamers為引物。
    2.后續(xù)實(shí)驗(yàn)為qPCR
    將Oligo dT與Random hexamers混合使用，可使mRNA的各個(gè)區(qū)域cDNA合成效率相同，有助于提高定量結(jié)果的真實(shí)性和重復(fù)性。
    Note
    For research use only .