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熱穩(wěn)定核酸內(nèi)切酶 IV 來源于嗜熱細(xì)菌，為脫嘌呤/脫嘧啶（AP）位點特異性的核酸內(nèi)切酶。該酶切割 AP 位點 5′ 端的第一個磷酸二酯鍵，產(chǎn)生 3′ 羥基和 5′ 脫氧核糖磷酸末端。除天然

的 AP 位點外，各種人工合成的 Spacer 分子也能夠被內(nèi)切核酸酶 IV 有效切割，包括 THF、SpacerC3、Spacer C12、Spacer 9，Spacer 18 等。該酶也具有 3′二酯酶活性，能從 DNA 的 3′末端釋放磷酸甘油醛（phosphoglycoaldehyde）、α,β-不飽和醛（α,β-unsaturated aldehydes）、3’-磷酸、其它 3' blocking groups。該酶還能夠作用于 DNA 分子的幾種氧化性損傷，水解氧化損傷堿基的5’端第一個磷酸二酯鍵。另外，該酶還具有 3′-5′的外切酶活性。酶活性受到金屬離子、DTT、EDTA

等的影響，優(yōu)先作用于 3′凹末端的雙鏈 DNA。

本公司熱穩(wěn)定核酸內(nèi)切酶 IV 是在大腸桿菌中重組表達(dá)，并親和純化的重組蛋白。

1 單位指在 65℃ 條件下，1 小時能切割 1 pmol 含一個 AP 位點的 34 bp 熒光標(biāo)記的寡核苷酸雙鏈所需要的酶量。

AP 位點的制備方法如下：37℃條件下，用 1U 尿嘧啶-DNA 糖基化酶（UDG）處理 10 pmol含一個尿嘧啶堿基的 34 bp 寡核苷酸雙鏈 2 分鐘。
活性測定：1× AM Buffer E：10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM (NH4)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Trition X-100（pH 8.8 @ 25℃），65℃ 溫育。

-20℃保存

具有很好的熱穩(wěn)定性，可以在 65-75℃反應(yīng)；

在多種反應(yīng)體系中均有活性。

1.與高溫 UDG 一起改善高忠實性 DNA 聚合酶 PCR 擴(kuò)增性能

2.單細(xì)胞凝膠電泳（彗星試驗）；

3.切斷合成的寡核苷酸中各種 Spacer，例如，Spacer C3，Spacer C18，Spacer 9 等；

4.修復(fù)損傷的 DNA。

相關(guān)測試表明無外源內(nèi)切、外切脫氧核糖核酸酶、RNase污染。PCR方法檢測無宿主殘余DNA。

? 該酶的最佳反應(yīng)溫度為 65-70°C。該酶與 PCR 反應(yīng)條件兼容。

? 彗星試驗的推薦稀釋度：1:104-1:10