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  • 產(chǎn)品名稱： Cdc42 Activation Assay Kit
  • 產(chǎn)品貨號(hào)： 80701
  • 貨期： 現(xiàn)貨
  • 價(jià)格與訂購： 6800
  • 數(shù)量：
    庫存： 5
  • 規(guī)格： 96T
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購
    產(chǎn)品說明
         小G蛋白是從屬于細(xì)胞調(diào)節(jié)因子中的一個(gè)超家族。Rho家族是小G蛋白中的一個(gè)亞家族，它在細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞分裂以及基因轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的Cdc42就屬于Rho亞家族中的一種， Cdc42參與生理活動(dòng)過程中其分子結(jié)構(gòu)會(huì)呈現(xiàn)出2種相互轉(zhuǎn)換的形式：與GTP結(jié)合的激活狀態(tài)和與GDP結(jié)合的非活性狀態(tài)。
           目前Cdc42蛋白活性的檢測(cè)主要是依據(jù)小GTP酶Cdc42可以與p21活化激酶（PAK）的p21結(jié)合區(qū)域（PBD）結(jié)合，使PAK活化從而發(fā)揮生物學(xué)功能，進(jìn)而間接的進(jìn)行Cdc42活性功能的監(jiān)測(cè)。然而此方法在檢測(cè)過程中存在著一定的局限性比如GTP水解成GDP的速度過快以及Cdc42-GTP結(jié)合蛋白與p21結(jié)合區(qū)域之間較低的親和力，導(dǎo)致這種檢測(cè)方法的重復(fù)性較差。
          武漢科斯坦生物技術(shù)有限公司推出的Cdc42活性檢測(cè)試劑盒主要是依據(jù)單克隆抗體能夠特異性的識(shí)別Cdc42-GTP結(jié)合蛋白，而不識(shí)別Cdc42-GDP結(jié)合蛋白，進(jìn)而簡單并且快速的進(jìn)行Cdc42的活性檢測(cè)。同時(shí)試劑盒中的Cdc42-GTP單克隆抗體也可以進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞和組織中Cdc42的活性監(jiān)測(cè)。每套試劑盒可以進(jìn)行20次檢測(cè)。
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    檢測(cè)原理
    武漢科斯坦生物技術(shù)有限公司的Cdc42活性檢測(cè)試劑盒主要是利用識(shí)別蛋白特異形態(tài)的Cdc42-GTP單克隆抗體特異性的去檢測(cè)細(xì)胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行GTPγS活化處理）活性Cdc42-GTP的水平。簡言之，特異性識(shí)別Cdc42活化構(gòu)象的鼠單克隆抗體可以特異性結(jié)合細(xì)胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來，再利用特異性識(shí)別Cdc42活化構(gòu)象的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測(cè)。
    試劑盒成分
    1. 特異性識(shí)別Cdc42活性構(gòu)象的鼠單克隆抗體（Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)）：小管裝--30ul (抗體濃度是1mg/ml)，抗體溶于PBS（pH7.4）并包含50%的甘油和0.05%的疊氮化鈉。此抗體可以特異性識(shí)別所有脊椎動(dòng)物中的Cdc42-GTP。
    2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管裝—400ul包含200ul Protein A/G agarose     和200ul 20%乙醇溶液。（使用時(shí)溶液需要充分混勻，再吸?。?/div>
    3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶裝—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0),     750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
    4. 特異性識(shí)別Cdc42活性構(gòu)象的兔多克隆抗體（Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody  (Catalog No.21010)）：小管裝--30ul (抗體濃度是1mg/ml)，抗體溶于PBS（pH 7.4）并包含有   50%的甘油
    5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管裝—100ul (10 mM) ，實(shí)驗(yàn)中0.5mL細(xì)胞裂解液使用      5ul GTPγS標(biāo)記。
    6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管裝—100ul (100 mM) ，實(shí)驗(yàn)中0.5mL細(xì)胞裂解液使用5ul GDP標(biāo)記。
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    儲(chǔ)存條件
    試劑盒的成分在試劑盒的有效期限內(nèi)必須存放于4°C條件下保存。
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    Note
    For Research Use Only.