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  • 產(chǎn)品名稱： Mycoplasma PCR Test Kit
  • 產(chǎn)品貨號： CSK00002
  • 貨期： 現(xiàn)貨
  • 價格與訂購： 2800
  • 數(shù)量：
    庫存： 1000
  • 規(guī)格：
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購

    概述（Summary）icon
    產(chǎn)品英文名（Product Name）
    Mycoplasma PCR Test Kit
    產(chǎn)品中文名
    支原體PCR檢測試劑盒
    產(chǎn)品描述（Description）
    支原體PCR檢測試劑盒是一款具有快速、靈敏、特異性高等特點的支原體檢測試劑盒，可用于細(xì)胞、培養(yǎng)基、動物血清等的支原體檢測。本產(chǎn)品通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（PCR）特異擴(kuò)增支原體16s rRNA 基因保守區(qū)域片段，進(jìn)行支原體檢測，能夠檢測包括M. arthritidis，M. hominis，M. hyorhinis，M. fermentans，M. orale，M. salivarium，M. bovis，M. bovigenitalium，M.pneumoniae，M. pirum等在內(nèi)的數(shù)十種常見支原體。
    儲存條件（Storage）
    儲存于-15 ~ -25℃。
    運輸方式（Shipping）
    干冰運輸。
    Note
    For research use only .
    使用方法（Standard Operating Procedure）icon
    1. 收取待檢樣品。貼壁細(xì)胞：待細(xì)胞生長至80%左右即可，使用細(xì)胞刮刀刮取細(xì)胞（送檢細(xì)胞不能用消化液消化細(xì)胞）；懸浮細(xì)胞：待細(xì)胞生長至80%左右即可直接進(jìn)入下一步離心；

    2. 1000rpm離心5min，棄上清，留100-200μl培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，沸水浴10min；      

    3. 將煮沸的細(xì)胞懸浮液12000rpm離心3-5min；

    4. 所得樣品取4μl直接用于PCR檢測，或凍存于-20℃?zhèn)溆茫?/p>

    注：一般以6孔板接種細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞生長至80-90％時即可取樣進(jìn)行檢測。培養(yǎng)液中的青霉素和鏈霉素不會影響檢測效果。

    5. PCR檢測

    5.1充分融化PCR反應(yīng)液，按照下表配制PCR反應(yīng)體系：

    組分

    陽性對照組

    陰性對照組

    實驗組

    PCR反應(yīng)液

    14μl

    14μl

    14μl

    引物

    2μl

    2μl

    2μl

    陽性對照

    4μl

    -

    -

    待檢樣本

    -

    -

    4μl

    ddH2O

    -

    4μl

    -

    5.2 將PCR反應(yīng)管放入PCR儀，參照以下參數(shù)運行PCR反應(yīng)程序：

    程序

    運行參數(shù)

    循環(huán)數(shù)

    預(yù)變性

    94℃ 5min

    -

    循環(huán)

    變性

    94℃  30s

    30

    退火

    55℃  30s

    延伸

    72℃  15s

    延伸

    72℃ 5min

    -

     

    5.3瓊脂糖凝膠電泳。

    6. 凝膠成像觀察

    注：支原體陽性細(xì)胞擴(kuò)增片段約270bp。

    M ：marker

    +  ：陽性對照

    -  ：陰性對照

    1-3：檢測為陽性的細(xì)胞

    4-5：檢測為陰性的細(xì)胞