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  • 產(chǎn)品名稱: 超級(jí)生物素快速標(biāo)記試劑盒
  • 產(chǎn)品貨號(hào): ARL0020SK
  • 貨期: 現(xiàn)貨
  • 價(jià)格與訂購: 2800
  • 數(shù)量:
    庫存: 100
  • 規(guī)格: 一盒
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購
    主要組分
    活性超級(jí)生物素 2mg/4mg/6mg
    超 濾 管 1支
    標(biāo)記緩沖液 30mL/60mL/90mL
    標(biāo)記物保存液 2mL/4ml/10ml
    助溶劑(DMSO) 1mL/1.5mL/2mL
    選購之前客戶需要根據(jù)待標(biāo)記物的分子量大小和標(biāo)記量選擇最適宜的型號(hào)

      產(chǎn)品編號(hào)

    最大標(biāo)記體積

    待標(biāo)記物最小分子量

    可標(biāo)記抗體量

    ARL0020S-3K-0.5mL

    0.5mL

    3kDa

    0.2-10mg

    ARL0020S-3K-4.0mL

    4.0mL

    3kDa

    1.0-80mg

    ARL0020S-3K-15mL

    15mL

    3kDa

    5-300mg

    ARL0020S-10K-0.5mL

    0.5mL

    10kDa

    0.2-10mg

    ARL0020S-10K-4.0mL

    4.0mL

    10kDa

    1.0-80mg

    ARL0020S-10K-15mL

    15mL

    10kDa

    5-300mg

    ARL0020S-30K-0.5mL

    0.5mL

    30kDa

    0.2-10mg

    ARL0020S-30K-4.0mL

    4.0mL

    30kDa

    1.0-80mg

    ARL0020S-30K-15mL

    15mL

    30kDa

    5-300mg

    ARL0020S-50K-0.5mL

    0.5mL

    50kDa

    0.2-10mg

    ARL0020S-50K-4.0mL

    4.0mL

    50kDa

    1.0-80mg

    ARL0020S-50K-15mL

    15mL

    50kDa

    5-300mg

    ARL0020S-100K-0.5mL

    0.5mL

    100kDa

    0.2-10mg

    ARL0020S-100K-4.0mL

    4.0mL

    100kDa

    1.0-80mg

    ARL0020S-100K-15mL

    15mL

    100kDa

    5-300mg

    產(chǎn)品介紹
    本生物素標(biāo)記試劑盒提供了超級(jí)生物素快速標(biāo)記所需全部試劑,用于含有伯氨基(NH2-)的蛋白/抗體/多肽或者其他大分子的標(biāo)記。本生物素通過其反應(yīng)原理如下
    產(chǎn)品特點(diǎn)
    延長(zhǎng)了生物素的連接臂,更少地減少空間位阻,也可以適合于細(xì)胞的表面標(biāo)記;
    使用方法簡(jiǎn)單,無需額外準(zhǔn)備試劑;
    節(jié)約時(shí)間,整個(gè)過程僅需 90min;
    通過離心脫鹽和去除游離的生物素,無需透析或者凝膠過濾;
    超級(jí)生物素標(biāo)記使用量的計(jì)算
    每個(gè)反應(yīng)中生物素試劑的使用量取決于待標(biāo)記蛋白質(zhì)的量和濃度。例如,通過我們實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析表明,標(biāo)記2mg/ml 的抗體(IgG ,150KD),使用生物素和抗體的分子比為 20:1 能達(dá)到最佳效果;其他蛋白的標(biāo)記可以根據(jù)實(shí)際情況,參照此比例類推。
    計(jì)算公式如下:
    其中:V(μL)為生物素的體積;
             V1(mL)為待標(biāo)記物(蛋白/抗體/其他含有伯胺-NH2的大分子);
             C1(mg/mL)為待標(biāo)記物的濃度;
             R 為生物素與待標(biāo)記物的分子比例;           
            M為待標(biāo)記物的分子量(道爾頓,Dalton,Da)
            C(mM)為生物素的濃度
    計(jì)算示例:我們將生物素配置成10mM的濃度,用來標(biāo)記1mL 的2mg/ml 的抗體(IgG ,150KD),準(zhǔn)備加入的生物素與抗體的比例為20:1,那么帶入公式計(jì)算
    實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
    1.仔細(xì)閱讀使用說明書。
    2.按照生物素標(biāo)記使用量的計(jì)算的公式計(jì)算所需要的生物素的量。
    3.提前 20min 從冰箱中取出試劑盒,使試劑盒各組分平衡至室溫。
    4.用助溶劑DMSO將活性超級(jí)生物素配制成10mM(2mg超級(jí)生物素加DMSO 440ul) 
     
     特別提示:
    A.       溶解的活性生物素最好一次性使用完,如果使用不完可以密封放在-20℃的冰箱內(nèi),一月內(nèi)可以使用,但是標(biāo)記效率會(huì)降低;
    B.       生物素助溶劑使用完之后需要立即密封保存,防止吸潮。
    操作步驟:(本操作步驟按照 1mg抗體的量進(jìn)行標(biāo)記)
    1.取1mg 待標(biāo)記抗體于超濾管中,并加入不超過超濾管最大體積的標(biāo)記緩沖液,12,000g 離心 10min;可以重復(fù)此步驟多次;最后一次超濾完成,可以加入適量標(biāo)記緩沖液調(diào)整抗體的濃度到2mg/mL左右;
     
    請(qǐng)注意:
         A.超濾管的最大體積和最大截留分子量,本實(shí)例超濾管的最大體積為 0.5mL;
         B.如果待標(biāo)記抗體濃度低時(shí),可先超濾離心濃縮;
         C.如果待標(biāo)記物含有游離的氨基(Tris,氨基酸或者其他干擾物,需要用標(biāo)記緩沖液反復(fù)超濾確保其去除干凈)
     
    2. 加入13.3μL溶解的活性超級(jí)生物素至上述超濾管中,并輕輕吹打混勻。放入 37℃恒溫箱中避光溫育 30min。
    3. 12,000 x g 離心 10min。
    4. 加入適量標(biāo)記緩沖液至上述超濾管中,并輕輕吹打混勻,12,000g 離心 10min, 重復(fù)此步驟多次。
    5. 收集超濾管中的溶液(即生物素標(biāo)記的抗體),加入等體積保存液,-20℃保存。
    Note
    For research use only .