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本試劑盒利用抗體和R-PE上游離的氨基，采用定向?qū)优悸?lián)技術(shù)將抗體分子與R-PE共價(jià)偶聯(lián)，本試劑盒采用加長臂方案，使被標(biāo)記抗體與熒光蛋白之間有一定長度柔性連接臂，避免由于位阻妨礙抗體活性或者熒光蛋白發(fā)光效率。

主要特點(diǎn)：

ü  試劑盒組分齊全，操作簡單，只要按照操作步驟進(jìn)行便可得到高品質(zhì)R-PE標(biāo)記抗體；

ü  本試劑盒所配置的R-PE為高純度，高活性熒光蛋白，熒光發(fā)光效率更高；

ü  本試劑采用定向偶聯(lián)技術(shù)，熒光蛋白和抗體都不會(huì)發(fā)生自連，保證偶聯(lián)物的特異性和均一性；

ü  試劑盒所使用的交聯(lián)劑增加了延長臂，確保不會(huì)因?yàn)榈鞍踪|(zhì)位阻而影響發(fā)光效率；

ü  鑒于R-PE的蛋白骨架特性，其抗淬滅能力更強(qiáng)。

試劑盒已經(jīng)提供材料：

ü  活化R-PE蛋白    1mg  可用于標(biāo)記0.3-0.5mg抗體

ü  標(biāo)記緩沖液     30ml

ü  抗體修飾試劑    30ul*1支

ü  30KMWCO超濾管   2支

ü  封閉試劑      1支（臨用前加DMSO 5ul）

ü  DMSO溶劑      200ul*1支

ü  說明書       1份

其他需要自備試劑材料：

2  待標(biāo)記的生物分子；

2  移液器及吸頭；

2  去離子水。

試劑盒儲(chǔ)存

試劑盒中抗體修飾試劑和封閉試劑放在-20?C，其余組分放在2-8℃可保存6個(gè)月以上。

試劑盒操作流程：

1.抗體的修飾

1）取待標(biāo)記抗體（純度>90%），用標(biāo)記緩沖液調(diào)整濃度到 5mg/ml左右為宜，按照每mg抗體加入2μl 抗體修飾試劑，輕輕混勻，在室溫下避光晃動(dòng)反應(yīng) 90分鐘；

2）反應(yīng)完畢后，將其轉(zhuǎn)入30KMWCO超濾管，用標(biāo)記緩沖液超濾3次（每次管芯殘留液體不超過原始液量1/4），得到修飾抗體；

2.活化R-PE蛋白與抗體偶聯(lián)

1）用標(biāo)記緩沖液復(fù)溶活化R-PE蛋白，濃度調(diào)整為5mg/ml；

2）將修飾抗體與活化R-PE蛋白，按照質(zhì)量比1:3比例（每mg修飾抗體對(duì)應(yīng)3mg活化R-PE蛋白）混合，室溫避光反應(yīng)2小時(shí)；

3）將封閉試劑管中加入5ul DMSO,；按照每0.5mg抗體5ul比例用量加入步驟2）反應(yīng)產(chǎn)物中，封閉未反應(yīng)完的活性基團(tuán)；

4）標(biāo)記好的抗體分裝，加入適當(dāng)保護(hù)劑，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>